Author's photo
Věra K.
biochemie

stanovení aktivity ATPázy

Zdravím, našel by se zde někdo, kdo by mi mohl pomoci se stanovením aktivity ATPázy? Předem děkuji! Níže uvádím naměřené hodnoty a data
zásobní roztok: navážka 0,378 g NaH2PO4 * 12 H2O , rozmícháno ve 100 ml destil. vody
uvedený vzorec: A = a * b * c
y = a * x + b
x = c
Podle Lambert- Beerova zákona platí:
A = a*b*c
A absorbance vzorku
a absorpční koeficient
b tloušťka měrné kyvety
c koncentrace měřené látky ve vzorku

Vzorek: slepý vzorek
c (obsah fosforečnanů mg/ml): 0
A (naměřená bsorbance): 0
F = c/A: 0

Vzorek: kalibrační řada
c (obsah fosforečnanů mg/ml): 0,1
A (naměřená bsorbance): 0,297
F = c/A: 0,337

Vzorek: kalibrační řada
c (obsah fosforečnanů mg/ml): 0,2
A (naměřená bsorbance): 0,595
F = c/A: 0,336

Vzorek: kalibrační řada
c (obsah fosforečnanů mg/ml): 0,4
A (naměřená bsorbance): 0,808
F = c/A: 0,50

Vzorek: kalibrační řada
c (obsah fosforečnanů mg/ml): 0,8
A (naměřená bsorbance): 0,993
F = c/A: 0,81

Vzorek: produkt enzymové reakce
c (obsah fosforečnanů mg/ml): neznámý
A (naměřená bsorbance): 0,638
F = c/A: 0,50

Výpočet kalibrační závislosti
c = A × F
c = 0,638 × 0,50
c = 0,319

Výpočet aktivity ATPázy ve vzorku
y = 1,146x + 0,1948
0,638 = 1,146x + 0,1948 / - 0,1948
0,4432 = 1,146x
1,146x = 0,4432 / : 1,146
x = 0,387
rovnice je získána z kalibračního grafu